Técnicas de Ácidos Nucleicos Recombinantes en la Hidatidosis quística (Enfermedad por Echinococcus granulosus)

 En la naturaleza

El echinococus posee las subunidades recombinantes AgB8 / 1 y AgB8 / 2, han demostrado ser valiosos para el diagnóstico de EC, son mejores que otros métodos ya que parecen producir una mejor especificidad con poca o ninguna pérdida de sensibilidad. Los productos proteicos maduros de estos genes son pequeños (alrededor de 8 kDa en masa), además llegan a presentar polipéptidos secretados ricos en hélice α, con capacidad de autoensamblaje generando oligómeros de alta masa molecular. (1)

Artificial

La vacuna de proteína recombinante, EG95, se ha utilizado con éxito en ensayos de vacuna de oveja contra CE en varios países. En este estudio, expresamos el antígeno modificado, EG95NC-GST, Los resultados demuestran que los medios SOC y TB proporcionaron altos rendimientos en densidad celular y expresión de proteína EG95. También se realizó la purificación de la proteína recombinante con cromatografía de afinidad (usando FPLC) para aumentar la pureza del EG95NC. (2)

Adn Recombinante
Fuente: Khan Academy

T: Vacunación contra la hidatidosis: Clonación molecular y expresión óptima del EG95NC- Antígeno recombinante en Escherichia coli.
O: Clonación molecular y expresión óptima del EG95NC- Antígeno recombinante en Escherichia coli.
G: EG95NC 
ER: XhoI 
EL: Ligasa T4
V: Plásmido pGEX (GE Healthcare)
CR: Procariota E. Coli Top10F
MTG: Transformación por Conjugación Bacteriana
MIC:  Cultivo con medio de caldo Luria (LB) y SDS-PAGE 

Bibliografía:

1. Folle AM, Kitano ES, Lima A, Gil M, Cucher M, Mourglia-Ettlin G, et al. Characterisation of Antigen B Protein Species Present in the Hydatid Cyst Fluid of Echinococcus canadensis G7 Genotype. PLoS Negl Trop Dis [Internet]. 3 de enero de 2017 [citado 2 de agosto de 2021];11(1):e0005250. Disponible en: https://journals.plos.org/plosntds/article?id=10.1371/journal.pntd.0005250

2. M J, M L, CG G, K T, A B, MM E, et al. Vaccination Against Hydatidosis: Molecular Cloning and Optimal Expression of the EG95NC - Recombinant Antigen in Escherichia coli. Protein J [Internet]. 1 de diciembre de 2017 [citado 26 de julio de 2021];36(6):472–7. Disponible en: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29139018/

Técnica de Hibridación en Pancreatitis Aguda

La Hibridación in situ de fluorescencia basada en imágenes de localización de fluctuación (fliFISH), ha demostrado ser una técnica muy útil para una detección y recuento precisos de copias de ARN en células individuales.  Con fliFISH multicolor, vemos patrones de expresión génica radial en islotes pancreáticos de ratón para la insulina, el factor de transcripción, NKX2-2 y su relación (Nkx2-2 / Ins2). Dando valores más altos en las células β en el núcleo y menor en la periferia, (en diabéticos). Sienta las bases para una transcriptómica unicelular confiable. (1)

Hibridación in situ
Fuente: Sysmex

Bibliografía:

1. Y C, D H, LM M, WB C, MJ G, C A, et al. Fluctuation localization imaging-based fluorescence in situ hybridization (fliFISH) for accurate detection and counting of RNA copies in single cells. Nucleic Acids Res [Internet]. 25 de enero de 2018 [citado 18 de julio de 2021];46(2). Disponible en: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29040675/

Prueba PCR en Pancreatitis Aguda

T: Las alteraciones en la expresión de varios microARN (miARN) ocurren en el tumor de PDAC y en lesiones preneoplásicas como la llamada neoplasia mucinosa papilar intraductal (IPMN)
O: Identificar qué miARN están alterados en biopsias líquidas de pacientes con PDAC e IPMN para encontrar nuevos biomarcadores no invasivos para una detección temprana.
M: 10 ml de sangre venosa periférica en anticoagulante estéril tratado con ácido etilendiaminotetraacético (K2EDTA)
AN: microARN (miARN) 
G: miR21-5p, miR-33a-3p, miR-320a, and miR-93-5p y CA19.9
PCR: PCR de transcripción inversa cuantitativa en tiempo real (qRT-PCR)
V:  EFO

PCR
Fuente: Redacción Médica

Bibliografía:

1. Vila-Navarro E, Duran-Sanchon S, Vila-Casadesús M, Moreira L, Gins A, Cuatrecasas M, et al. Nuevas firmas de miARN circulantes para la detección temprana de neoplasias pancreáticas. Clin Transl Gastroenterol [Internet]. 2019;10(4):1–9. Disponible en: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31009404/

Alteraciones de la Epigenómica en la Pancreatitis Aguda

En el curso de la pancreatitis se ha detectado varias modificaciones, como lo son: que las actividades de las serín/treonín proteín fosfatasas PP2A, PP2B y PP2C en la PA (1 h post-inducción) disminuyeron en un 50%, 57% y 29%, respectivamente, respecto a los controles. La pentoxifilina previene la inducción de genes de respuesta temprana (egr-1, atf-3) y tardía (inos, icam, il-6, tnf-alpha), y el reclutamiento de las histonas acetiltransferasas a sus promotores génicos, así como el reclutamiento de factores de transcripción (NF-kB y C/BPbeta), todo esto como parte de la epigenómica (1).

Genes pancreatitis
Fuente: Info.Farmacia

1. Escobar J, Sandoval J, Pereda J, Sacilotto N, Rodríguez JL, Sabater L, et al. ACTIVIDAD DE LA SER/THR FOSFATASA PP2A Y REGULACIÓN EPIGENÉTICA DE GENES PRO-INFLAMATORIOS EN LA PANCREATITIS AGUDA. Gastroenterol Hepatol [Internet]. 1 de marzo de 2009 [citado 4 de julio de 2021];32(3):181. Disponible en: https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0210570509000946